• 图1带多位置阀的制备型高效液相色谱系统，可实现峰回收。

• 图2在峰回收的帮助下，(+/)-α-生育酚与更多的(5µm，红色)和更便宜的柱材料(黑色)的分离比较。

作品简介:

通过峰值回收，用户可以受益于更有效的净化和降低成本。本文介绍了峰值回收在什么情况下是合理的，以及它所需要的技术规范。通过多次使用柱床的长度，峰回收基本上延长了柱的分离长度。大多数制备色谱的使用者都知道这个术语，但不一定知道这种特殊的溶液在哪些情况下是有益的。在峰回收过程中，峰在洗脱后被带回到柱上。因此，在一起运行的临界峰对可以随着每个周期进一步分离。峰回收的唯一要求是等晶分离方法，因为洗脱液的组成需要在多次重复循环中保持恒定。一种制备型高效液相色谱系统，由进样系统、制备泵、制备柱、检测器、分馏阀组成。制备用色谱柱通常非常昂贵。bob电竞下载因此，用户希望在产生的成本和获得的分离效率之间找到最佳的折衷。 The individual separation challenge and the requirements for the purification thereby set the conditions. That is why complex separation challenges can lead to high expenses and cost-ineffective solutions. In cases where special phases or small particle sizes are required for an efficient purification, not only the cost factor of the preparative column but also the system requirements are limiting. Peak recycling offers a surprisingly simple solution to increase the separation performance without the need for larger investments.

技术要求:

“回收”和“回收模式”通常用来描述不同类型的回收:

1.基于时间的峰回收:这种模式不是自动的，适用于任何色谱软件，但配置起来会更加繁琐。在一次分离中保留时间的变化会导致收集馏分纯度的差异。

2.自动峰回收:在这种模式下，软件根据峰的高度和/或坡度来控制回收。自动化模式需要特别的软件包(例如OpenLAB CDS EZChrom Edition)，提供高水平的舒适性和安全性。

3.溶剂回收:一些软件包，如ClarityChrom Prep或PurityChrom提供所谓的溶剂回收作为节省溶剂的额外选择。如果色谱中没有峰的区域的溶剂可以被认为是干净的，溶剂被回收到洗脱液中。这可以基于检测器信号或时间。这种模式可以大大降低系统的运行成本。

只需一个多位置阀门和一个t型配件就可以实现回收模式。这种阀门通过t型接头通过一个端口(在大多数情况下是阀门的第二个最后端口)连接到系统泵供应系统。当系统应该从正常模式跳到循环模式时，阀门被切换到那个特定的端口。随后，泵将不从库存中提取洗脱液，而是通过整个系统循环使用溶剂(图1)。样品将被循环泵入，直到阀门切换到分馏或废液位置。

应用程序:

两个(+/-)-α-生育酚异构体的分离是一个很好的实际例子，在峰回收的帮助下优化分离过程。制备高效液相色谱的优化潜力远比分析高效液相色谱有限。对于反相模式的制备应用，柱材料的bob电竞下载选择实际上限制在最小粒径为10µm的标准相。这种内径为20 ~ 100mm的制备色谱柱一方面表现出较低的分离性能，但另一方面在高流速下产生的背压要比类似的小粒径色谱柱低得多。对于那些面临像生育酚这样复杂的分离任务的用户来说，目标物质只能与污染物分离，因此他们的选择将很快受到限制(图2)。用于更好分离的特殊相的成本和所需的高性能泵往往超过了收益。无论如何，对正常情况下受损的分离性能进行妥协甚至是不必要的。使用正确的技术，这种廉价的大颗粒材料也可以取得很好的分离效果。对于标准条件下的(+/-)-α-生育酚的纯化，通常用户必须为较低纯度的高收率付出代价，反之亦然。然而，通过峰回收分离长度的延长，基线分离已经可以在三个重复循环后实现(图2黑色)。因此，可以在不影响纯度和收率的情况下进行分馏。

维生素E和生育酚:

维生素E由一组脂溶性物质组成。其中还有8种生育酚的变体，其中唯一的活性形式是α-生育酚。只有具有生物活性的形式与食品工业有关。α-生育酚主要用于食品工业，如E307，以及化妆品成分。为了测定它们的活性，立体异构体需要从彼此色谱分离。

结论:

峰回收(图2，黑色)能够增强α-生育酚异构体的分离。纯度和收率可与更昂贵的色谱柱材料相媲美(图2，红色)。一个标准的高效液相色谱系统可以很容易地转换为实现峰回收。KNAUER高效液相色谱系统的模块化结构使其成为实现和优化此类技术的理想选择。像用于在分馏和回收模式之间切换的多位置阀这样的组件可以很容易地集成到系统中。

文章发表在:分析学家